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熒光顯微鏡用濾光片是實(shí)現(xiàn)熒光成像高對(duì)比度、高特異性的核心光學(xué)元件，主要作用是精準(zhǔn)分離激發(fā)光與熒光信號(hào)，濾除雜光干擾。

主要類型及功能

- **激發(fā)濾光片**：多為帶通型，僅允許特定短波長(zhǎng)激發(fā)光通過（如匹配FITC的490nm左右波段），確保熒光標(biāo)記物被精準(zhǔn)激發(fā)。

- **發(fā)射濾光片**：常為長(zhǎng)波通或帶通型，只讓熒光物質(zhì)發(fā)射的長(zhǎng)波長(zhǎng)信號(hào)通過（如FITC發(fā)射的520nm左右熒光），阻擋未被吸收的激發(fā)光。

- **二向色鏡（分光鏡）**：置于激發(fā)光與熒光光路之間，反射短波長(zhǎng)激發(fā)光至樣品，同時(shí)透射長(zhǎng)波長(zhǎng)熒光信號(hào)至檢測(cè)器，實(shí)現(xiàn)光路分離。

### 關(guān)鍵要求

- 高匹配性：中心波長(zhǎng)需與熒光染料的激發(fā)/發(fā)射峰精準(zhǔn)對(duì)應(yīng)（如DAPI染料對(duì)應(yīng)350nm激發(fā)、460nm發(fā)射濾光片）。

- 高透過率：通帶內(nèi)透過率≥90%，保證熒光信號(hào)強(qiáng)度。

- 高截止深度：截止波段（如激發(fā)光對(duì)發(fā)射光路的干擾）需≥OD6，大幅降低背景噪聲。

### 應(yīng)用價(jià)值

通過三者協(xié)同，熒光顯微鏡可清晰觀察細(xì)胞內(nèi)熒光標(biāo)記的結(jié)構(gòu)（如細(xì)胞核、細(xì)胞骨架），廣泛用于細(xì)胞生物學(xué)、病理學(xué)等研究，是熒光成像中提升信噪比的關(guān)鍵。